/ICS 67.120.10 B 43 DB12 天 津 市 地 方 标 准 DB12/T 528—2014 种猪场猪瘟净化技术规范 The technical standard for cleaning classical swine fever in breeding pig farm 2014-08-04 发布 2014-09-01 实施 天津市市场 和质量监督管理委员 会 发布 DB12/ T 528—2014 前 言 本标准的编写符合GB/ T1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》的要求。 本标准由天津市畜牧兽医局提出。 本标准起草单位：天津市动物疫病预防控制中心。 本标准主要起草人：李颖、郭立力、朱雅宁、王健春、尹春博、郭恋、赵静、陈海明、梁智选、 齐莹莹。 I DB12/ T 528—2014 种猪场猪瘟净化技术规范 1 范围 本标准规定了种猪场猪瘟净化的术语和定义、要求、检测方法与判定标准、净化群的建立、净化场 的认定和净化群的维持。 本标准适用于种猪场猪瘟净化工作。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 16548-2006 病害动物和病害动物产品生物安全处理规程 GB/T 27540-2011 猪瘟病毒实时荧光 RT-PCR 检测方法 GB/T 16551-2008 猪瘟诊断技术 NY/T 1168-2006 畜禽粪便无害化处理技术规范 《猪瘟防治技术规范》（农业部，2007.04） 《跨省调运乳用、种用动物产地检疫规程》（农医发201033号） 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 猪瘟 Classical Swine Fever；CSF 由黄病毒科瘟病毒属猪瘟病毒(CSFV)引起的一种猪的高度接触性、出血性和致死性传染病。 3.2 净化 cleaning 对某病发病地区采取一系列措施，达到消灭和清除传染源的目标。 3.3 变异指数 coefficient of variance；CV值 标准差与平均数的比值，它是衡量资料中各观测值变异程度的一个统计量。 3.4 种猪 breeding pig 供繁殖用的成年公猪、母猪。 3.5 后备猪 replacement pig 70日龄至配种前选留作繁殖用的青年公、母猪。 3.6 哺乳仔猪 suckling pig 初生后至断奶前的仔猪。 4 4.1 要求 使用合格的猪瘟疫苗进行免疫接种，疫苗来源记录真实、完整，免疫档案齐全，耳标佩戴率 100%。 2 DB12/ T 528—2014 4.2 4.3 4.4 4.5 4.6 5 猪瘟野毒感染阳性率≤8%。 种猪场近12个月内应无口蹄疫、高致病性猪蓝耳病发生。 应建立和健全完善的生物安全管理体系，并保证管理体系有效运行。 应配备与饲养规模相适应的兽医专业技术人员。 生产管理状况良好。 检测方法与判定标准 5.1 检测方法 5.1.1 病原学检测 5.1.1.1 猪瘟抗原检测 采集猪血清，依据《猪瘟防治技术规范》（农业部，2007.04），利用猪瘟抗 原双抗体夹心ELISA方法检测猪瘟抗原。 5.1.1.2 猪瘟病毒检测 采集活体猪扁桃体或病死猪扁桃体、淋巴结、脾脏和肾脏，依据GB/T 16551-2008，利用直接免疫荧光抗体试验方法，检测猪瘟病毒。 5.1.1.3 猪瘟病毒核酸检测 采集活体猪扁桃体、血清或病死猪扁桃体、脾脏、肾脏、淋巴结等，依 据 GB/T 16551-2008 或 GB/T 27540-2011，利用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）试验或实时荧光 RT-PCR 检测方法，检测猪瘟病毒核酸。 5.1.2 血清学检测 猪瘟病毒抗体检测 采集猪血清，按照《猪瘟防治技术规范》（农业部，2007.04），利用猪瘟病 毒抗体阻断 ELISA 方法检测猪瘟病毒抗体。 5.2 合格免疫抗体判定标准 5.2.1 个体免疫抗体合格标准 猪瘟免疫抗体按 5.1.2 检测，阻断率≥40%。 5.2.2 群体免疫抗体合格标准 猪瘟免疫抗体的阻断率≥40%的头数要达到 100%，≥50%的头数要达到 90%，阻断率的 C V 值≤25%。 6 净化群的建立 6.1 免疫接种 根据已制定的免疫程序及选择的疫苗，对所有 5 周龄以上的猪只实施强化免疫。 6.2 监测 6.2.1 采样时间和采样数量 6.2.1.1 种公猪 免疫后3～4周，种公猪按100%比例采血，或同时按100%比例采活体猪扁桃体。 6.2.1.2 母猪 可根据母猪群的数量采用下列任何一种方法。 a) 免疫后3～4周，母猪群一次性按100%比例采血，或同时按100%比例采活体猪扁桃体。 b) 母猪群每季度按25%比例采血，或同时按25%比例采集活体猪扁桃体。连续12个月内，同1头母猪 不进行2次采样。 6.2.1.3 后备猪 所有选留的后备猪在转入种猪群前 1～2 周，按 100%比例采血，或同时按 100%比例采活体猪扁桃体。 6.2.1.4 1周内完成待检猪血清样品或活体猪扁桃体样品的采集。 6.2.2 检测方法和处置 6.2.2.1 检测方法 a) 猪瘟病原检测按 5.1.1 中任一方法执行。 b) 猪瘟免疫抗体检测按 5.1.2 执行。 3 DB12/ T 528—2014 6.2.2.2 处置 a) 猪瘟病原检测阳性者，应淘汰处理。 b) 猪瘟病原检测阴性且免疫抗体合格者，可作为种猪保留。 c) 猪瘟病原检测阴性且免疫抗体不合格者，用猪瘟疫苗再次强化免疫，免疫后 3～4 周重新采样进 行免疫抗体检测。 d) 强化免疫后个体免疫抗体水平仍未达到 5.2.1 合格标准者，应淘汰处理。 6.2.2.3 在最后 1 头阳性猪淘汰后 3 个月且猪群免疫后 4 周以上，在 7 日内对种公猪按 100%比例、母 猪按 10%比例采血，或同时种公猪按 100%比例、母猪按 10%比例采集活体猪扁桃体样品，再次进行免疫 抗体检测和猪瘟病原检测。 6.2.2.4 如抽检种猪群猪瘟病原检测全部阴性且群体抗体水平符合 5.2.2 免疫抗体合格标准可视为假 定猪瘟阴性群。 6.2.2.5 建立后的假定猪瘟阴性群，按照 8 净化群的维持要求进行监测。 6.3 综合性卫生防疫措施 6.3.1 引进猪只的检疫 按照《跨省调运乳用、种用动物产地检疫规程》（农医发201033 号）规定引进猪只。建立专门隔 离饲养舍，严格检疫引进猪只。在种猪启运前对拟引进猪只逐头进行检测，确定猪瘟病毒阴性、抗体阳 性方可启运引进，引进后必须进行 45～60 天隔离饲养并进行猪瘟病原检测，确保没有猪瘟病毒感染和 带毒后方可混群。 6.3.2 外来供精种猪的检疫 使用外来种公猪的精液时，必须在购买前对供精种公猪进行严格检疫，保证供精种猪猪瘟病毒阴性， 抗体水平合格。 6.3.3 病死猪的检测 6.3.3.1 要及时收集病死猪只，进行猪瘟病毒检测或猪瘟病毒核酸检测，检测方法按 5.1.1.2 或 5.1.1.3 执行。 6.3.3.2 若哺乳仔猪猪瘟病毒检测或猪瘟病毒核酸检测阳性，则检测对应的亲本母猪，阳性者淘汰。 6.3.4 严格执行人员和车辆等物品的消毒措施 6.3.4.1 控制人员出入，猪场门口和各猪舍门口应设立消毒池，定期更换消毒药水。 6.3.4.2 进入猪场的车辆除过消毒池消毒外，还应对车身进行喷洒消毒。 6.3.4.3 饲养、管理等人员可采取淋浴、消毒液洗手、紫外线照射衣物等方式消毒。 6.3.4.4 衣、帽、鞋等可能被污染的物品，可采取浸泡、高压灭菌等方式消毒。 6.3.4.5 一线饲养人员严禁串舍，生产工具不得混用。 6.3.5 场内及舍内环境的消毒 6.3.5.1 场内应设置净道和污道，对场内道路和明沟可用 2%的氢氧化钠溶液喷洒消毒。 6.3.5.2 猪舍在有猪的状态下，要选用无刺激或刺激性小的消毒药进行舍内环境消毒，平时预防一般 1 周消毒 1～2 次。 6.3.6 无害化处理措施 病死猪按GB 16548-2006 的要求、粪便按 NY/T 1168-2006 的要求进行无害化处理。 6.3.7 杀虫防蝇灭鼠措施 场区内不得饲养其他易感动物。定期开展杀虫、防蝇和灭鼠工作，消灭传播媒介和传染源。 7 净化场的认定 种猪场应符合下列所有条件，即达到猪瘟净化标准。 7.1 种猪场连续 12 个月对所有 6 月龄以上种猪至少进行 1 次病原学监测，监测结果为阴性。 7.2 连续 2 年内使用合格的猪瘟疫苗，按照免疫程序进行免疫接种。 4 DB12/ T 528—2014 7.3 种猪场种公猪按 100%比例抽样，母猪按 20%比例抽样，进行抗体检测，检测方法按 5.1.2 执行， 个体免疫抗体水平符合 5.2.1 且群体免疫抗体水平符合 5.2.2 合格标准。 7.4 种猪场种公猪按 100%比例抽样，母猪按 20%比例抽样，进行病原学监测，检测方法按 5.1.1.2 或 5.1.1.3 执行，猪瘟病毒检测或猪瘟病毒核酸检测为阴性。 7.5 有监测证据表明在过去 12 个月内猪群没有出现猪瘟临床病例。 8 净化群的维持 8.1 免疫 种猪场要制定并实施合理的免疫程序，选用合格的猪瘟疫苗，按照免疫程序进行免疫接种。 8.2 监测 8.2.1 日常检测 8.2.1.1 每年对假定猪瘟阴性种猪群进行 3～4 次抽检。每次采集血清和活体扁桃体样品，抽样比例为 存栏种猪的 25%～35%。应在连续 12 个月内，对 6 月龄以上种猪每头至少进行 1 次血清抗体检测和猪瘟 病原检测，检测方法按 5.1.2 及 5.1.1 执行。 8.2.1.2 个体免疫抗体水平符合 5.2.1 且群体免疫抗体水平符合 5.2.2 合格标准者，为免疫抗体合格。 8.2.1.3 抽样复查如猪瘟病原检测出现阳性，应重新按照 6.2 对种猪群开展净化，确保种猪群猪瘟病 毒阴性。 8.2.2 后备猪的检测 选留的后备猪在转入种猪群前，进行免疫抗体检测及猪瘟病原检测，样品采集、检测方法及处置同 6.2.1.3、6.2.2。 8.2.3 引进猪只的检疫 对引进猪只严格进行检疫、隔离，确保引进猪只没有猪瘟病毒感染和带毒，具体按照 6.3.1 执行。 8.2.4 外来供精种猪的检疫 对外来供精种公猪进行检疫，确保供精种公猪猪瘟病毒检测或猪瘟病毒核酸检测阴性，抗体水平合 格。 8.2.5 病死猪的检测 病死猪只应进行猪瘟病毒或猪瘟病毒核酸检测，样品采集及检测方法同 6.3.3。如若病死猪猪瘟病 毒或猪瘟病毒核酸阳性，应重新按照 6.2 对种猪群开展净