ICS 65.020.99 B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1103.22006 转基因植物及其产品食用安全检测 抗营养素第2部分：胰蛋白酶 抑制剂的测定 Safety assessment of genetically modified plant and derived products 行业标准信息服务平台 2006-07-10 发布 2006-10-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 1103.2—2006 前 言 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、农业部科技发展中心、中国农业大学、 天津市卫生防病中心。 本标准主要起草人：杨月欣、王竹、韩军花、李宁、汪其怀、黄昆仑、刘克明、刘培磊、连庆。 行业标准信息服务平台 I NY/T 1103.2—2006 转基因植物及其产品食用安全检测 抗营养素第2部分：胰蛋白酶抑制剂的测定 1 范围 本标准规定了转基因植物及其产品中胰蛋白酶抑制剂的测定方法。 本标准适用于转基因大豆及其产品、转基因谷物及其产品中胰蛋白酶抑制剂的测定。其他的转基 因植物，如花生、马铃薯等也可用该方法进行测定。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 转基因植物 genetically modified plant 指利用基因工程技术改变基因组构成,用于农业生产或者农产品加工的植物。 2.2 转基因植物产品 products derived from genetically modified plant 指转基因植物的直接加工产品和含有转基因植物的产品。 3原理 胰蛋白酶可作用于苯甲酰-DL-精氨酸对硝基苯胺(BAPA),释放出黄色的对硝基苯胺,该物质在 410nm下有最大吸收值。转基因植物及其产品中的胰蛋白酶抑制剂可抑制这一反应，使吸光度值下 降,其下降程度与胰蛋白酶抑制剂活性成正比。用分光光度计在410nm处测定吸光度值的变化,可对 胰蛋白酶抑制剂活性进行定量分析。 4试验材料 转基因植物及其产品、受体植物及其产品。如果对转基因植物产品中的胰蛋白酶抑制剂进行测定， 转基因植物产品和受体植物产品的处理条件应相同。 上述材料的水分含量和种植环境应基本一致。 5 试剂 除非另有说明，仅使用分析纯试剂；水为蒸馏水。 5.1三羟甲基氨基甲烷[tris(hydroxymethyl)aminomethane,Tris] 。 5.20.05mol/LTris缓冲液：称取6.05gTris和2.94g氯化钙(CaCl2?2H2O)溶于800mL水中,用浓 盐酸调节溶液的pH至8.2,加水定容至1L。 5.30.01mol/L氢氧化钠溶液：称取0.4g氢氧化钠，加入800mL水溶解后，再加水定容至1L。 5.4成烷：已烷(1:1,V:V)。 5.5 1 mmol/L盐酸。 5.6胰蛋白酶：大于10000BAEEμ/mg。 BAEE为Nα-苯甲酰-L-精氨酸乙烷酯(Nα-benzoyl-L-arginine ethyl ester）。BAEEu(BAEE单位)表 1